Вакцины из клеток патогенных микробов

Вакцины из инактивированных клеток патогенов - представляют собой взвесь клеток болезнетворных бактерий или грибов, обладающих выраженной иммуногенностью, но лишенные патогенности. Их получают инактивируя микробную взвесь нагреванием, добавлением формалина, спирта, ацетона, облучая ее ультрафиолетовым светом или разрушая ульт- развуком. В качестве одного из примеров приготовления убитой вакцины может быть приведена технология производства сухой спиртовой брюшнотифозной вакцины. Для ее изготовления применяют штаммы бактерий, возбудителей брюшного тифа. Одним из таких штаммов является штамм Salmonella typhi.

Технологический процесс, состоит из следующих стадий.

I) Подбор вакцинных штаммов. Для приготовления убитой вакцины отбирают несколько наиболее вирулентных и полноценных в антигенном отношении штаммов. Вирулентность - степень болезнетворного действия микроба. Ее можно рассматривать как способность микроба адаптироваться к организму хозяина, т.е. к новой среде, и преодолевать его защитные механизмы.

2) Получение маточной культуры (посевного материала). Посевным материалом служит 18-часовая агаровая культура в изотоническом растворе хлорида натрия (0,8%NaCl) с числом клеток 5-10 4 кл/мл, вводимая в объеме 5-10% к объему засеваемой среды, или 5-6-часовая бульонная культура.

3) Приготовление и стерилизация питательной среды. Брюшнотифозные бактерии выращивают на белково-гидролизатных или нолуеинтетических средах, позволяющих получать достаточно высокий выход биомассы, например бульон гидролизата казеина.

4) Выращивание микробной взвеси - ферментация. Выращивание проводят в асептических условиях методом глубинного культивирования в ферментерах. Режим культивирования периодический. В процессе культивирования подается стерильный воздух. Дополнительное перемешивание эарируемой среды обеспечивается турбинной или роторной мешалкой. Параметры культивирования: t=37°C, pH 7,6-7,8. Выращивание проводят 10-12 ч до концентрации бактерий порядка 4-6 -1010 кл/мл.

5) Инактивация микробной взвеси. Для проведения инактивации полученную взвесь микробных клеток двукратно обрабатывают 96%-м этиловым спиртом в соотношении 1:4 и 1:10 соответственно. Обработку проводят при тщательном перемешивании в специальных емкостях.

6) Отделение клеток от кулътуралъной жидкости, как правило, проводят центрифугированием.

7) Титрование вакцины (стандартизация). Инактивированную биомассу ресуспенди-руют в зотоническом растворе хлорида натрия. Готовая вакцина должна содержать эпределенное количество микробных тел в 1 мл. Титр убитой брюшнотифозной вакцины составляет 5 • 109 кл/мл. К готовой вакцине прибавляют консервант, например, фенол (0,25%).

8) Контроль производится трем основным критериям:

а) стерильность (отсутствие живых клеток генного микроба);
б) безвредность (определение переносимости и токсичности);
в) эффективность (способность препарата формировать антибактериальный иммунитет).
9) Розлив в ампулы;

10) Лиофилизация. пензюо в ампулах замораживают при t= - 40 - 50°С и лиофильно высущивают (в режиме возгонки воды).

11) Запайка ампул под вакуумом.

Убитыми являются вакцины против брюшного тифа, бруцеллеза (лечебная), гонореи, дизентерии, коклюша, холеры, лептоспироза и др.

Комментировать